background_scan_m

Осенняя жара!!!


скидка 25% на ХЕЛИК-скан- М

Скан в рассрочку!!!


Скидка 10% на ХЕЛИК-скан- М
и рассрочка на 6 месяцев
slide1

Диагностика стала быстрее,
проще и безопаснее!

bg3

bg2

Аммиачный дыхательный тест ХЕЛИК®, используемый для диагностики Helicobacter pylori в желудке и некоторые ошибки при проведении исследования


Важное открытие, которое долгое время было без внимания

Болезни желудочно-кишечного тракта являются одними из самых распространенных. Это касается и населения нашей страны, и людей, живущих в, казалось бы, более благополучных странах Европы или Америки. Статистика утверждает, что случаи гастрита и язвы за последние два десятилетия стали все чаще и чаще появляться среди молодежи. Увеличилось также и число больных раком желудка. Это далеко неполный список недугов, которые поражают эту систему органов.

При этом врачи научились довольно успешно бороться с большинством из них, если не полностью излечивая, то хотя бы добиваясь долговременной ремиссии в случае хронических заболеваний. Но при этом долгое время гастроэнтерологи не могли установить точную причину возникновения многих недугов, которые поражают ЖКТ. Конечно, путем обследования статистических данных и лабораторного анализа проб больных теми или иными недугами, врачи сумели составить список факторов, которые увеличивают шансы заболеть на гастрит или язву, рак желудка или дуоденит. Но точно выделить определяющую причину долгое время не удавалось. При этом бактерия Helicobacter pylori была обнаружена довольно давно, в далеком 1875 году. Но ее влияние на здоровье человека оставалось загадкой на протяжении почти полутора веков! Эту бактерию то и дело обнаруживали то немецкие, то российские ученые, но не могли культивировать ее, а значит – и исследовать ее воздействие на клетки живого организма в лабораторных условиях, поэтому долгое время она была безымянна и забыта.

Только в 1979 году австралийский патолог Робин Уоррен и его ассистент Барри Маршалл провели ряд исследований в ходе которых им удалось выделить и изолировать этот микроорганизм из желудка человека, после чего – культивировать его в искусственных средах и достаточно подробно исследовать его жизнедеятельность. На это ушло несколько лет, но в 1981 году ученые первыми в мире высказали предположение, что большинство случаев язв желудка и двенадцатиперстной кишки, а также гастритов и ряда других недугов этой системы органов появляется именно из-за воздействия токсинов, которые в процессе своей жизнедеятельности выделяет Helicobacter pylori. Медицинское мировое сообщество долгое время не обращало внимания на это, поскольку данное предположение было недостаточно обоснованным с научной точки зрения.

Чтобы доказать свою правоту спустя много лет Барри Маршалл провел эксперимент на себе. Он умышленно заразил себя Helicobacter pylori, после чего заболел гастритом. И, проведя курс лечения, направленного не на традиционное изменение уровня кислотности желудка, а на уничтожение бактерии, сумел излечить себя в течение 14 дней. Таким образом, спустя 10 лет это открытие уже не вызывало сомнений. В 1994 год Национальный институт здравоохранения США, руководствуясь данными, полученными благодаря исследованиям Уоррена и Маршалла, рекомендовал включить антибиотические лекарственные препараты в курс лечения язв и гастритов. Это стало официальным признанием правоты австралийских исследователей, которые за свой несомненный вклад в медицину получили в 2005 году Нобелевскую премию.

Но Helicobacter pylori при этом считается той бактерией, обнаружение которой достаточно проблематично. Чтобы найти ее в пробах больного, долгое время нужны были долгие и целенаправленные кропотливые лабораторные исследования. Однако сейчас, благодаря новым данным о самой Helicobacter pylori, далось разработать неинвазивное средство, позволяющее найти эту бактерию на ранних стадиях протекания болезни ЖКТ. Речь идет об аммиачном дыхательном тесте ХЕЛИК®.

По какому принципу работает аммиачный дыхательный тест, ХЕЛИК®-тест, H.pylori, желудок.

Бактерия Helicobacter pylori (H.pylori) в процессе жизнедеятельности в большом количестве выделяет особый фермент уреазу. Бактериальная уреаза разлагает мочевину в желудке до углекислого газа и аммиака. Мочевина попадает из крови в желудочный сок и через специальные каналы проходит в цитоплазму бактериальной клетки H.pylori. Без этих каналов мочевина не может пересечь плазматическую мембрану. В цитоплазме клетки мочевина изменяет свою клеточную структуру с образованием двух молекул аммиака и одной молекулы углекислого газа. Данные соединения становятся «протонными ловушками» в цитоплазме и периплазме H.pylori и нейтрализуют соляную кислоту, что позволяет выживать данной бактерии даже в условиях неблагоприятной для нее окружающей среды.

Продуцирование H.pylori большого количества фермента уреазы привело к созданию методов его косвенного обнаружения в организме человека, к которым относятся быстрый уреазный тест и уреазный дыхательный тест. Уреазный дыхательный тест представлен на рынке в двух вариантах: углеродный и аммиачный дыхательные тесты. Первый основан на регистрации концентраций СО2 в выдыхаемом воздухе до и после приема мочевины. Согласно рекомендациям 4-го Маастрихтского консенсуса 2012 года по диагностике и лечению инфекции H.pylori, уреазный дыхательный тест с использованием специальной мочевины остается лучшим неинвазивным тестом для диагностики инфекции H.pylori. Во-первых, он имеет высокую точность и его легко выполнять. Во-вторых, при проведении теста применяются особые диагностические наборы, которые не обладают радиоактивностью. Единственным недостатком данного теста является его стоимость: для оценки углеродного дыхательного теста требуется высокочувствительный газовый масс-спектрометр, стоимость которого составляет около 200 000 — 250 000 $ или менее дорогой (в десять раз дешевле), но в то же время и менее чувствительный инфракрасный спектрометр. Кроме этого, нарушение протокола проведения теста, которое часто встречается в клинической практике, приводит к потенциальному снижению диагностической надежности углеродного дыхательного теста.

Ко второму варианту относится аммиачный дыхательный тест ХЕЛИК®. Он основан на регистрации нарастания концентрации аммиака в ротовой полости, которая увеличивается при гидролизе мочевины в желудке под действием бактериальной уреазы при персистенции H.pylori. Таким образом, ХЕЛИК®-тест также относится к неинвазивной дыхательной диагностике инфекции Helicobacter pylori. Преимуществом аммиачного дыхательного теста является его доступность и большой опыт применения в клинической практике. При прохождении обследования с  ХЕЛИК®-тестом, пациент может испытывать неудобства из-за того, что приходится сидеть в кабинете на протяжении всего времени пока отбирается проба воздуха (от 9 до 15 минут), тогда как методики с определением изотопов углерода предусматривают всего несколько секунд на надувание пакета или отбор пробы в пробирку. Однако в углеродных дыхательных тестах промежуток времени между приемом нагрузки и отбором нагрузочной пробы составляет 30 минут – это время пациент обычно проводит в коридоре, ожидая вызова врача.

Согласно оценке эффективности использования аммиачного дыхательного теста ХЕЛИК для диагностики H.pylori в слизистой оболочке желудка, у пациентов с синдромом диспепсии и обнаружение этого патогена в большинстве случаев проходит быстро и без ошибок.

Как проводилось исследование эффективности ХЕЛИК®-теста

Далее будет приведена история клинических исследований, благодаря результатам окторых была доказана эффективность теста ХЕЛИК®.

Диагностика инфекции H.pylori в теле и антральном отделе желудка проведена у 46 пациентов (1 группа) которые на момент осмотра жаловались на боль или дискомфорт в эпигастральной области. Средний возраст пациентов составил 39 лет (минимальный -19,  максимальный — 70 лет), соотношение мужчин и женщин 12/34. Для оценки валидности метода, 69 пациентам (2 группа) у которых на момент осмотра присутствовали боль или дискомфорт в эпигастральной области, была проведена диагностика инфекции H.pylori только в антральном отделе желудка. Средний возраст пациентов составил 37 лет (минимальный — 18, максимальный — 70 лет), соотношение мужчин и женщин 21 к 48. Отбор пациентов проводился методом случайных чисел (равномерное распределение, метод «лототрона») из 521 пациента, проходивших стационарное или амбулаторное обследование. Критерии включения пациентов в группу: наличие жалоб на боли или дискомфорт в эпигастральной области на момент осмотра, гистологическое исследование слизистой оболочки антрального отдела (1 и 2 группы) и тела желудка (1 группа) с использованием Хьюстонской модификации Сиднейской классификации хронического гастрита. Закончили исследование 103 пациента (1 группа, n=42 и 2 группа, n=61). Четыре человека (8,7%; 95% ДИ: 0,01%-17,0%) были исключены из 1 группы и 8 (11,6%; 95% ДИ: 3,9%-19,3%) человек из 2 группы по критериям исключения (отсутствие данных гистологического исследования слизистой оболочки желудка с оценкой по критериям и градациям Хьюстонской модификации Сиднейской классификации хронического гастрита). Полнота отслеживания составила соответственно 91,3% и 88,4%.

Оценка морфологических изменений слизистой оболочки желудка проведена по визуально-аналоговой шкале с использованием морфологических критериев и градаций Хьюстонской модификации Сиднейской классификации хронического гастрита (активность, воспаление, атрофия, кишечная метаплазия, дисплазия эпителия Н.pylori). Диагностика Н.pylori осуществлялась морфологическим методом (1 и 2 группа; окраска методом Гимзы с использованием стандартной визуально-аналоговой шкалы), с помощью индивидуальной формы выпуска быстрого уреазного теста ХЕЛПИЛ®-бланк (2 группа) и стандартной тест-системы аммиачного дыхательного теста ХЕЛИК® с индикаторной трубкой (1 и 2 группа) [7]. Все специалисты, проводившие оценку результатов различных методов диагностики, в том числе и референтного, не знали результатов других анализов и тестов у одних и тех же пациентов (слепой метод).

В первой группе пациентов для оценки результатов аммиачного дыхательного теста в качестве референтного метода диагностики Н.рylori использовался «золотой» стандарт – морфологический метод (гастробиоптаты тела (3 биоптата) и антрального отдела (2 биоптата) желудка).

Во второй группе пациентов для оценки результатов аммиачного дыхательного теста в качестве референтных методов диагностики Н.рylori использовался уреазный экспресс-тест и «золотой» стандарт – морфологический метод (один гастробиоптат антрального отдела желудка). Биоптат, полученный из слизистой оболочки антрального отдела желудка, помещали на тест-систему ХЕЛПИЛ® (3 минуты; оценка уреазной активности), а затем отправляли на гистологическое исследование. Это позволило сопоставить результаты референтных методов — быстрый уреазный тест и морфологический метод, используя один и тот же биоптат.

Таблица 1. Стандартная таблица для определения операционных характеристик диагностического теста

Результат теста Бактерия Всего
имеется отсутствует
 

Положительный

ИП

a

ЛП

b

 

a + b

Отрицательный c

ЛО

d

ИО

c + d
Всего a + c b + d a + b + c + d

Примечания: a – истинно положительные (ИП), b – ложноположительные (ЛП), c – ложноотрицательные (ЛО), d – истинно отрицательные (ИО) результаты теста.

Для обработки данных на персональном компьютере использовались стандартные пакеты программ статистического анализа. Возраст пациентов и длительность заболевания (в годах) были представлены как среднее (Х) ± стандартное отклонение (SD). P уровни < 0,05 считались достоверными. Таблицы размерности 2х2 обрабатывались критерием χ2. Для относительных частот определялся 95% доверительный интервал (ДИ).

Результаты исследования

В первой группе пациентов H.рylori в слизистой оболочке желудка обнаружен морфологическим методом у 18 человек. Аммиачный дыхательный тест ХЕЛИК® оказался положительным у 19 человек. При регистрации нарастания концентрации аммиака в ротовой полости истинно положительные (a) и ложноположительные (b) результаты аммиачного дыхательного теста ХЕЛИК® оказались соответственно в 17 и 2 случаях, истинно отрицательные (d) и ложноотрицательные (c) результаты теста – соответственно в 22 и 1 случаях.

Результаты оценки эффективности ХЕЛИК®-теста для диагностики H.pylori в слизистой оболочке желудка  в первой группе пациентов приведены в Таблице 2. Установлены высокие показатели клинической эффективности аммиачного дыхательного теста ХЕЛИК® для диагностики H.pylori в желудке, при использовании в качестве референтного метода морфологическую диагностику H.pylori в 5 биоптатах слизистой оболочки тела и антрального отдела желудка (согласно существующим международным стандартам).

Таблица 2.

Оценка эффективности Дыхательный тест

ХЕЛИК (95% ДИ)

Чувствительность (Se) % 94 (83-100)
Специфичность (Sp) % 92 (81-100)
Распространенность (P) % 43 (28-58)
Точность теста (TA) % 93 (85-100)
Прогностическая ценность при отрицательном результате теста (-PV) % 96 (88-100)
Прогностическая ценность при положительном результате теста (+PV) % 90 (76-100)
Отношение правдоподобия положительного результата теста (LR+) 11,8 (3,0-46,1)
Отношение правдоподобия отрицательного результата теста (LR-) 0,06 (0,01-0,42)

Примечания: СО – слизистая оболочка, ДИ – доверительный интервал.

Совпадение положительных результатов теста отмечено у 13 человек, отрицательных – у 4 человек. Несовпадение результатов теста выявлено в 1 случае (Таблица 3). Таким образом, воспроизводимость метода составляет – 17/18 = 94%.

Результаты оценки эффективности ХЕЛИК®-теста для диагностики H.pylori в слизистой оболочке желудка (субстрат – 1 биоптат слизистой оболочки антрального отдела желудка, методы сравнения – биохимический и морфологический) второй группы пациентов (n=61) приведены в Таблице 4. Установлены достоверные различия показателей клинической эффективности (специфичность, точность и прогностическая ценность при положительном результате теста) аммиачного дыхательного теста ХЕЛИК® для диагностики H.pylori в желудке, с использованием в качестве референтного метода морфологическую диагностику H.pylori и уреазный экспресс-тест (субстрат — 1 биоптат слизистой оболочки антрального отдела желудка).

Установлены достоверные различия показателей клинической эффективности аммиачного дыхательного теста ХЕЛИК® для диагностики H.pylori в желудке. Таковыми являются: специфичность, точность, прогностическая ценность при отрицательном результате теста, отношение правдоподобия положительного результата теста.

Установлены сопоставимые высокие показатели клинической эффективности аммиачного дыхательного теста ХЕЛИК® для диагностики H.pylori в желудке, с использованием в качестве референтного метода морфологическую диагностику H.pylori в 5 биоптатах слизистой оболочки тела и антрального отдела желудка или уреазный экспресс-тест 1 биоптата слизистой оболочки антрального отдела желудка.

Таблица 3. Оценка эффективности аммиачного дыхательного теста ХЕЛИК® для диагностики H.pylori в слизистой оболочке желудка.

Оценка эффективности Референтный метод
Уреазный экспресс-тест (95% ДИ) Морфологический метод (95% ДИ)
Чувствительность (Se) % 95 (92-98) 81 (68-94)
Специфичность (Sp) % 83 (73-93) 48 (28-68)
Распространенность (P) % 70 (58-82) 59 (46-72)
Точность теста (TA) % 92 (85-99) 67 (55-79)
Прогностическая ценность при отрицательном результате теста (-PV) % 90 (82-98) 63 (41-85)
Прогностическая ценность при положительном результате теста (+PV) % 94 (87-100) 69 (55-83)
Отношение правдоподобия положительного результата теста (LR+) 5,6 (1,9-15,8) 1,6 (1,1-2,4)
Отношение правдоподобия отрицательного результата теста (LR-) 0,06 (0,01-0,25) 0,4 (0,2-0,9)

Примечания: СО – слизистая оболочка, ДИ – доверительный интервал.

Основные данные о стадиях жизнедеятельности H.pylori и то, как эта информация может помочь для обнаружения бактерии

H.pylori существует на поверхности слизистых оболочек с желудочным эпителием в виде биопленки. Процесс созревания биопленки H.pylori проходит ряд этапов:

1) первичное (обратимое) прикрепление бактерий к слизистой оболочке;

2) окончательное (необратимое) прикрепление или фиксация H.pylori к слизистой оболочке (начало продукции внеклеточного полисахаридного матрикса);

3) созревание биопленки (стадия созревание-I);

4) рост биопленки (стадия созревание-II);

5) выброс бактерий из биопленки.

Что касается бактериальной уреазы, то данный фермент, вместе с бактерией, находится как на поверхности эпителия стенок желудка, так и в слизи, поэтому уреазный экспресс-тест может быть положительным, а H.pylori может отсутствовать при последующем проведении морфологического исследования. Это связано с тем, что часть слизи остается на поверхности теста и теряется вместе с H.pylori при проводке и заключении материала в парафин для изготовления гистологических срезов.

ХЕЛИК®-тест – метод, основанный на выявлении содержания аммиака в ротовой полости, образующегося при гидролизе мочевины на всей площади слизистой оболочки желудка, покрытой биопленкой H.pylori. Биоптат представляет собой очень малую часть слизистой оболочки желудка, поэтому диагностика H.pylori в одном биоптате только из антрального отдела желудка может быть малоинформативна. Достоверно повышает вероятность обнаружения H.pylori в СО желудка взятие нескольких биоптатов из разных отделов желудка (тело, угол, антральный отдел желудка). Это подтверждается результатами нашего исследования.

Установлено увеличение показателей клинической эффективности аммиачного дыхательного теста ХЕЛИК® для диагностики H.pylori в желудке с использованием в качестве референтного метода морфологическую диагностику. Полученные данные подтверждают гипотезу о том, что в тех местах, где слизистая оболочка модифицирована (атрофия средней и тяжелой степени, кишечная метаплазия и дисплазия эпителия) отмечается низкая частота встречаемости H.pylori. Таким образом, применять в качестве референтного метода морфологическую диагностику H.pylori в одном биоптате СО антрального отдела желудка недостаточно для получения достоверных результатов эффективности аммиачного дыхательного теста.

Как запасной вариант для оценки клинической эффективности аммиачного дыхательного теста можно использовать в качестве референтного метода уреазный экспресс-тест с одним биоптатом СО антрального отдела желудка.

Выводы об эффективности теста для обнаружения бактерии H.pylori

Благодаря полученным результатам лабораторного анализа теста ХЕЛИК® можно сделать ряд выводов касательно его эффективности

  1. Для оценки эффективности аммиачного дыхательного теста ХЕЛИК®, в качестве референтного метода, рекомендуется использовать «золотой» стандарт (морфологический метод) с диагностикой pylori в теле (3 биоптата) и антральном отделе желудка (согласно существующим международным стандартам).
  2. При соблюдении международных стандартов взятия биопсийного материала в желудке аммиачный дыхательный тест ХЕЛИК® имеет высокую клиническую эффективность для диагностики pylori в желудке (чувствительность – 94%, специфичность – 92%, точность – 93%, воспроизводимость – 94%).
  3. Нарушения протокола взятия биопсийного материала для морфологического исследования при оценке эффективности аммиачного дыхательного теста приводят к потенциальному занижению показателей и операционных характеристик диагностического теста.
  4. При использовании в качестве референтного метода «золотого» стандарта (морфологического метода) с диагностикой pylori только в антральном отделе желудка (1 биоптат) отмечается высокий процент получения ложных результатов, что приводит к заниженной оценке эффективности аммиачного дыхательного теста ХЕЛИК®.
  5. Для оценки клинической эффективности аммиачного дыхательного теста можно использовать в качестве референтного метода уреазный экспресс-тест с одним биоптатом СО антрального отдела желудка.
  6. При использовании в качестве референтного метода уреазный экспресс-тест аммиачный дыхательный тест ХЕЛИК® имеет высокую клиническую эффективность для диагностики pylori в желудке (чувствительность – 95%, специфичность – 83%, точность – 92%).
  7. Аммиачный дыхательный тест ХЕЛИК® целесообразно применять в терапевтической практике в качестве метода диагностики pylori.

Таким образом на данный момент этот тест является наиболее эффективным средством для обнаружения бактерии, которая является основной причиной возникновения язв желудка и двенадцатиперстной кишки и гастрита, провоцирует возникновение рака желудка и дуоденита, а также, по результатам некоторых исследований – лимфомы желудка. Что особенно важно: использование ХЕЛИК® представляет собой быструю процедуру, которую моно осуществить в условиях любой частной или государственной клиники. Сам пациент при этом совершенно не испытывает дискомфорта, ведь данный тест является дыхательным и потому – неинвазивным, то есть исключает любое проникновение в ткани организма. Ни боли, ни дискомфорта, ни лишнего стресса.



Аммиачный дыхательный тест ХЕЛИК®, используемый для диагностики Helicobacter pylori в желудке и некоторые ошибки при проведении исследования: Один комментарий

  1. Уведомление: Get your documents written perfectly

Комментарии запрещены.